• 產(chǎn)品品牌： REAGEN
• 產(chǎn)品貨號： RNS92049
• 產(chǎn)品規(guī)格： 20T
• 產(chǎn)品適用： 流感病毒H5N1的檢測和判定
• 產(chǎn)地來源： 深圳

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：流感病毒H5N1亞型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

【包裝規(guī)格】

50人份/盒

【預(yù)期用途】

對樣本中流感病毒H5N1亞型RNA進(jìn)行檢測，適用于流感病毒H5N1型感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查。

【檢驗原理】

本試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）結(jié)合Taqman技術(shù)，對禽流感病毒H5N1亞型的特異性核酸片段進(jìn)行熒光PCR檢測。

【主要成分】

 【儲存條件及有效期】

試劑置于-30~-15℃避光保存，有效期為12個月。本產(chǎn)品反復(fù)凍融應(yīng)不超過5次。

【適用儀器】

熒光定量PCR儀：ABI 7500熒光PCR儀.；ABI Quantstudio5 ；Gentier 96R；SLAN-96P全自動醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)。

【樣本要求】

1. 適用樣本

咽拭子：應(yīng)使用專用采樣拭子，適度拭抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位；迅速將拭子放入標(biāo)本采集管中，旋緊管蓋并密封，以防干燥。                                      

全血：疑似感染動物的靜脈血2mL至EDTA-2Na抗凝管，8000rpm離心2min，取適量上清液于1.5mL滅菌離心管中。

2. 樣本運(yùn)輸和保存

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過6個月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

 【檢驗方法】

  1. 樣本處理

取待測樣本200ul，按照核酸提取試劑盒說明書進(jìn)行核酸提取。

  2. 試劑配置（在準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行，與擴(kuò)增區(qū)分開，冰上操作）

注：試劑使用前要完全解凍，使用前渦旋混勻，10000 rpm離心5 s，確保試劑完全離心至管底，否則會出現(xiàn)裝量差異的現(xiàn)象。

若有N個待檢測樣本，則需配置N+2擴(kuò)增反應(yīng)（待檢樣本數(shù)N+1個陽性質(zhì)控品+1個陰性質(zhì)控品），按下表要求進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)液的配制，配制完成后充分震蕩混勻，10000 rpm離心5 s。按每管20μL分裝至0.2 ml PCR管中，并做好標(biāo)記，擴(kuò)增反應(yīng)液需現(xiàn)配現(xiàn)用。

  3. 加樣（在樣品處理區(qū)進(jìn)行，冰上操作）

按陰性質(zhì)控品、待測樣品、陽性質(zhì)控品的加樣順序，分別取5μL，加入至已分裝擴(kuò)增反應(yīng)液的八聯(lián)管中，反應(yīng)總體系為25μL。蓋緊管蓋，短暫離心后置于熒光定量PCR儀中，并記錄樣本擺放順序。

  4. 擴(kuò)增反應(yīng)（在擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行）

選擇FAM通道檢測H5亞型，選擇HEX通道檢測N1亞型。按以下擴(kuò)增程序表設(shè)置PCR擴(kuò)增參數(shù)。